熒光定量PCR技術(shù)，顧名思義，就是在PCR的基礎(chǔ)上加入熒光基團(tuán)，通過熒光信號(hào)的變化的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR的反應(yīng)過程，zui后通過對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
目前，熒光定量PCR已成為不同樣品間進(jìn)行基因表達(dá)水平定量差異比較的權(quán)wei性方法。在過去十幾年中，該方法迅速流行，涉及科學(xué)的多個(gè)領(lǐng)域。
DNA有著雙螺旋結(jié)構(gòu)，當(dāng)溫度達(dá)到95攝氏度時(shí)，雙鏈的DNA會(huì)分解成為單鏈狀態(tài)，而在溫度到達(dá)72攝氏度左右時(shí)，DNA聚合酶會(huì)沿著磷酸到五碳糖的方向進(jìn)行合成。聚合酶鏈反應(yīng)PCR就是通過不斷地調(diào)節(jié)溫度，以數(shù)量級(jí)的速度增加DNA數(shù)量的方法。而熒光定量PCR是指，在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)的變化實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化，通過Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的關(guān)系對(duì)起始模板進(jìn)行定量分析。
PCR技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥食品等行業(yè)，應(yīng)用于疾病的早期診斷、遺傳病的早期診斷、藥物研究、腫瘤的診斷與研究、食品病原微生物的檢測(cè)、轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)、動(dòng)物疫病檢測(cè)等，除此之外，還包括：
1、基因擴(kuò)增；
2、擴(kuò)增特異性分析；
3、基因定量分析；
4、基因檢測(cè)；
5、基因分型；
6、SNP分析；
7、RFLP多態(tài)性分析；
8、單/多基因表達(dá)研究；
9、高通量基因表達(dá)譜研究等。
大量的熒光定量PCR研究資料表明，病原體數(shù)量與感染性疾病病情的輕重程度、傳染性及治療效果均有相關(guān)性。因此，通過熒光定量PCR方法得到的檢測(cè)結(jié)果，一定程度上可以準(zhǔn)確反映疾病感染的情況。
